Особенности размножения медоносных пчел, обеспечивающие сохранение их как вида, затрудняют контроль за спариванием маток и трутней. Известно, что спаривание маток с трутнями происходит в воздухе на высоте 30—50 м над землей в радиусе до 15 км от пасеки. Другая особенность заключается в том, что пчелиная матка спаривается не с одним, а несколькими трутнями (полиандрия). Трутень, спариваясь один раз с маткой, погибает, поэтому возможность подбора родительских пар практически отсутствует.
В истории развития контролируемого спаривания пчелиных маток выделяются два этапа: период поисков его различных методов и внедрение и совершенствование инструментального осеменения, начатые еще в 30-х гг. XX столетия. На первом этапе поиск лучшего метода контролируемого спаривания проводили в разных направлениях. Неплодных маток с трутнями помещали в ульи, банки, бутылки, садки, палатки, большие изоляторы и т. д.
Для этого пчелиные семьи вывозили в горы, на острова, в пустыни... Отдельные исследователи испытывали метод стимулирования лета маток и трутней для спаривания в ранние и поздние часы, когда обычный лет был закончен. Для успешного спаривания сперму трутней вносили в камеру жала матки, поднимали привязанную к шесту неплодную матку, предоставляя возможность ей для брачного полета, использовали для осеменения медицинский шприц.
Несмотря на некоторые успехи, ни один из методов не получил должного развития. Лучше других способов оказалась изоляция маток и трутней во времени и пространстве. В ряде стран с развитым пчеловодством были подобраны изолированные пункты, где проводилось контролируемое спаривание.
С середины 30-х гг. успешно начал развиваться метод инструментального осеменения пчелиных маток. В этот период быстрыми темпами совершенствовались методика и аппаратура. Современная техника начинается с работы Уотсона (1927), который применил микрошприц, закрепленный в манипуляторе. При этом методе матку прикрепляли к деревянному бруску нитками. Камеру жала открывали пинцетом.
Аппарат для инструментального осеменения сконструировал Нолан (1937). Для фиксации матки он применил трубчатый держатель, а для раскрытия камеры жала — специальные крючки.
Маккензен и Роберте (1948) усовершенствовали аппарат Нолана, изменив тип шприца с резиновой диафрагмой, улучшили форму крючков и зонда и стали вводить тонкий наконечник шприца непосредственно в непарный яйцевод. Веселы (1960) изменил форму иглы в шприце Маккензена, сделав ее конец на расстоянии 1,5 мм цилиндрическим, что облегчает осеменение мелких маток некоторых пород. Ее можно ввести в непарный яйцевод без влагалищного зонда.
Лейдлоу (1944) сконструировал аппарат, у которого движения крючков и шприца управляются винтами. Для анестезии матки он применял углекислый газ. Им установлено значение влагалищного клапана у матки. Он первый использовал зонд для его опускания при осеменении.
В нашей стране инструментальное осеменение маток впервые применил Михайлов (Тульская опытная станция пчеловодства, 1927). Начиная с 1957 г. этот метод используют в Научно-исследовательскоом институте пчеловодства. Тряско (1958), усовершенствовав шприц, добилась полноценного осеменения значительного числа пчелиных маток. Теперь в НИИ пчеловодства работают три лаборатории, где при селекции породной группы «приокская» проводят планируемые осеменения маток спермой трутней и продолжают работу по совершенствованию данного метода.
Инструментальное осеменение позволяет полностью контролировать спаривание маток и трутней, значительно повышает эффективность селекционно-племенной работы. Этот метод является основным при разведении пород и линий пчел в чистоте, выведении новых линий и типов пчел, скрещивании определенных пород и линий для получения гетерозисных пчел.
Нормальному спариванию пчелиных маток в естественных условиях часто препятствуют плохие погодные условия. Использование искусственного осеменения позволяет производить эту работу независимо от дождей и похолоданий. С помощью искусственного осеменения успешно решается вопрос получения плодных маток в ранние сроки, к началу формирования весенних отводков.
Получение плодных маток связано с формированием нуклеусов (небольших семеек) для содержания до начала кладки ими яиц после спаривания. При заселении ими ульев и их функционировании часто наблюдаются слеты пчел. Потери маток при подсадке и вылетах на спаривание достигают 50%. При инструментальном осеменении отпадает необходимость в формировании нуклеусов. Этот метод настолько хорошо разработан, что потери маток от повреждений и заболеваний, возникающих при осеменении, не превышают 10%.
Замечено, что варроатоз способствует существенному ухудшению качества получаемых маток. В связи со значительным поражением клещами варроа многие трутни становятся неполноценными. Естественное спаривание маток с такими трутнями приводит к получению недоброкачественных маток (семяприемник бывает наполнен частично). Это приводит к частой самосмене маток в пчелиных семьях. При искусственном осеменении обеспечен надежный контроль как за качеством самих трутней, так и количеством спермы, вводимой пчелиной матке.
Выращивание трутней. Работа по искусственному осеменению пчелиных маток будет успешной, если на пасеке достаточно половозрелых трутней известного происхождения. Отцовские семьи выделяют из числа наиболее продуктивных, зимостойких, здоровых и типичных для размножаемой породы или линии пчел. Отобранные пчелиные семьи тщательно готовят к зиме, помещая трутневые соты при сборке гнезда осенью или сразу после весеннего облета пчел. Чтобы ускорить начало выращивания трутневого расплода, семьи из зимовника для очистительного облета выставляют на две недели раньше обычного срока.
Поздней весной для получения в короткие сроки изобилия трутней матку целесообразно содержать в изоляторе из разделительной решетки на трутневом соте в течение 2—3 сут. Затем сот с яйцами извлекают и переносят в гнездо. За два дня до выхода трутней сот со зрелым расплодом снова помещают в изолятор, а выходящих трутней метят цветными красками.
В гнездах отцовских семей должно быть не менее 10 кг меда и 2 полные рамки перги. При недостатке белкового корма пчелиные семьи не смогут вырастить много трутней. Им питаются и трутни в первые дни жизни, когда у них накапливаются и созревают сперматозоиды. В первые 6—7 дней жизни трутней отсутствие пыльцы ведет к недостатку у них спермы, необходимой для полноценного осеменения матки.
При временном прекращении медосбора среди лета пчелы могут изгонять трутней из семьи, поэтому в такие периоды пчел целесообразно подкармливать медово-перговой смесью или небольшими порциями сахарного сиропа. Если же изгнание началось, от семьи формируют отводок с маткой для сохранения трутней.
Иногда от плодных маток очень трудно получить достаточное количество трутней. Особенно неохотно откладывают неоплодотворенные яйца молодые матки в первый год жизни. Для получения трутневых яиц разработано несколько способов.
Плодную матку 2 дня по 6—8 ч ежедневно выдерживают при температуре 0...5°С. Во время такой обработки она впадает в оцепенение, а в обычных условиях приходит в нормальное состояние и около 10 дней откладывает только неоплодотворенные яйца (Бетчер, 1967).
Можно использовать и другой прием. Неплодную матку в 5—6-дневном возрасте анестезируют углекислым газом 15—20 мин. Через 2 дня процедуру повторяют. На 12—14-й день жизни матка начинает откладывать неоплодотворенные яйца. Для получения ранних трутней в зиму формируют сильные пчелиные семьи с матками-трутовками. Такие матки ранней весной начинают откладывать неоплодотворенные яйца.
Трутневые яйца можно получить и от пчел-трутовок. Для этого на трутневых сотах из молодых пчел формируют отводок и обильно подкармливают медово-перговой смесью. Через 10 дней они начинают откладывать яйца. Трутневые соты с яйцами переставляют в сильные семьи-воспитательницы, которые воспитывают трутней хорошего качества (Шаскольский, 1953).
В связи с варроатозом получение полноценных трутней приобретает существенное значение. Известно, что при наличии в семье трутневого расплода клещ варроа предпочитает поселяться прежде всего в нем. Семьи, пораженные этой инвазией, характеризуются меньшей массой, продуцируют меньше спермы, у них низкая жизнеспособность. Обработка отцовских семей акарицидами или термоспособом может привести к значительной гибели трутней. Чтобы они были полноценными, необходимо использовать пчелиные семьи, наименее пораженные варроатозом. Отобранные отцовские семьи обрабатывают акарицидными препаратами после весенних облетов, до появления трутневого расплода.
Трутни гаплоидны, у них нарушен правильный гаметогенез, поэтому для него необходим диплоидный набор хромосом. Исследователи, изучавшие этот вопрос, пришли к выводу, что первое редукционное деление является абортивным, а второе — неравным, дающим начало лишь одному сперматозоиду, тогда как в норме их должно быть четыре. Сперматогенез происходит в семенниках трутня. Сперматозоиды по мере созревания переходят в семенные пузырьки, но тем не менее готовность трутней к спариванию наступает через 14 дней после выхода их из ячеек. Семенные пузырьки служат временными хранилищами спермы.
Объем семени одного трутня составляет в среднем 1,7 мм3. Шприцем обычно удается взять всего 1 мм спермы, количество сперматозоидов в которой колеблется от 7,5 до 9,4 млн. Сперматозоиды трутня медоносной пчелы сходны с другими насекомыми. У них нет ясно видимой линии разграничения между головкой и хвостом. Он представляет собой тонкую нить, суживающуюся к концу. Длина сперматозоида трутня достигает 250 мк, млекопитающего — лишь 40—60 мк.
Сперма медоносной пчелы — жидкость кремового цвета, рН которой колеблется от 6,7 до 7,1. Чем выше число сперматозоидов, тем темнее окраска спермы и выше ее вязкость. Отношение жидкости и сперматозоидов в эйякуляте колеблется от 1:1 до 1:2, в зависимости от времени года и других факторов. В отличие от высших животных, у которых сперматозоиды совершают прямолинейные поступательные движения, движения спермиев трутней манежны, они двигаются поступательно по кругу небольшого диаметра, с радиусом не больше длины самого сперматозоида. Это характерно для низших животных с оплодотворением, происходящим вне организма. После осеменения сперматозоиды перемещаются в специальный орган пчелиной матки — спермоприемник, где находятся длительное время.
Вывод маток. При выводе пчелиных маток для искусственного осеменения используют наиболее эффективные методы. До начала этих работ семьи весной обрабатывают от варроатоза акарицидными препаратами согласно существующим инструкциям. Наилучшими по качеству считаются роевые матки. Пчелы воспитывают их в сильных семьях, имеющих много разновозрастного расплода и обильные кормовые запасы при наличии в природе поддерживающего медосбора. Чтобы получить высококачественных маток при искусственном выводе, необходимо создать условия, подобные тем, которые складываются в семьях в роевой период.
При выборе семей в качестве воспитательниц предпочитают сильные семьи с общей массой пчел не менее 4 кг, которые переходят в роевое состояние. В гнезде семьи-воспитательницы должно быть не менее 8 рамок с печатным расплодом, 12 кг меда и 2 рамки с пергой. Наличие печатного расплода обеспечивает постоянную температуру в гнезде и пополнение семьи молодыми пчелами, а открытого — максимальное количество пчел-кормилиц. При отсутствии медосбора семьи-воспитательницы следует подкармливать.
Для вывода маток используют молодые личинки, вылупившиеся из наиболее крупных яиц не более чем 12 ч назад. Их должно быть не более 30 шт. На 10-й день после прививки личинок маточники помещают в клеточки Титова, размещая их в специальных рамках-питомниках, и ставят в семьи-воспитательницы между рамками с разновозрастным расплодом этой же семьи. Клеточки снабжают кормом и в каждую предварительно отлавливают по 4—6 пчел из семьи-воспитательницы. Если этого не сделать, пчелы через несколько часов после выхода маток из маточников будут кормить только некоторых из них, а остальные погибнут от голода или так ослабнут, что не перенесут осеменения.
В семьях-воспитательницах, где насчитывается по 50 маток, их содержат в течение всего периода проведения инструментального осеменения. Этот метод по сравнению с распространенным содержанием в нуклеусах обеспечивает удобный доступ к маткам, исключает их отлов и потерю при вылетах, позволяет поддерживать оптимальный тепловой режим в гнезде независимо от внешней температуры, не требует затрат пчел, сотов и кормов.
Оборудование лаборатории (рис. 12). Лаборатория должна быть чистой, светлой, изолированной, хорошо освещенной. Температуру в ней необходимо поддерживать в пределах 25...28 °С, а влажность воздуха — не более 80%.
Рис. 12. Оборудование лаборатории для осеменения пчелиных маток
Инструментальное осеменение пчелиных маток успешнее проходит при строгом соблюдении требований санитарии. Поверхность рабочего стола, стен и пола в лаборатории должна иметь гладкое покрытие, чтобы ее легче было дезинфицировать. В помещении не допускается наличие мертвых и блуждающих пчел, способствующих распространению инфекций. Окна и двери завешивают легкой тканью, марлей или тюлем.
До начала работы в лаборатории моют пол, стены и стол, если на них замечены следы фекалий пчел. Аппарат и все инструменты, которые соприкасаются с маткой или спермой, стерилизуют 96%-ным спиртом. На 5—10 мин включают бактерицидную лампу, ультрафиолетовые лучи которой дезинфицируют окружающий воздух и поверхность стола с инструментами.
Маток перед осеменением обрабатывают углекислым газом, который анестезирует их и стимулирует начало яйцекладки.
Для проведения инструментального осеменения пчелиных маток необходимы:
Рис. 13. Стандартный аппарат для осеменения
1. Аппарат для инструментального осеменения (рис. 13, 14). Он должен быть простым, удобным и надежным в работе. Известны аппараты конструкции Маккензена и Робертса, Лейдлоу, Веселы. Аппарат Маккензена и Робертса после ряда усовершенствований, предложенных Руттнером, Шнайдером и Френе, стал стандартной моделью и получил широкое распространение. В СССР была закуплена партия аппаратов конструкции Веселы из Чехословакии.
Рис. 14. Аппарат Веселы для осеменения пчелиных маток
Аппарат для инструментального осеменения пчелиных маток состоит из следующих основных элементов:
подставки с основной пластиной и двух поддерживающих стоек, на которых крепятся блоки вентрального и жального крючков и блок шприца;
блока с газовым шлангом и держателем, предназначенным для фиксации матки;
вентрального и жального крючков, закрепленных на стойках подставки со свободным движением, необходимым для раскрытия камеры жала матки;
шприца для отбора и впрыскивания спермы в половые пути матки, который представляет собой полую трубку с нарезкой на обоих концах. В нее ввинчивается металлический поршень, переходящий в подвижный тастер. Конец тастера соприкасается с резиновой мембраной, которая соединяется с муфтой. Свободное пространство заполняют физиологическим раствором, затем ввинчивают наконечник шприца, изготовленный из акриловой смолы. Физиологический раствор действует как жидкий поршень, с помощью которого сперма втягивается в наконечник или выталкивается из него. Так как наконечник хрупкий, к нему заранее делают капилляры, изготовленные из стеклянных трубочек диаметром 3—5 мм. Трубочки нагревают на газовой горелке и вытягивают до диаметра 0,8—1,2 мм. Затем над пламенем спиртовки один из концов капилляра доводят до 0,25—0,3 мм, шлифуют его наждачной бумагой и оплавляют в пламени спиртовки. Подготовленный капилляр приклеивают к концу наконечника менделеевской замазкой.
2. Баллон с углекислым газом, редуктором, шлангами, соединяющими его с блоком маткодержателя, и сосудом для анестезии матки. Чтобы контролировать интенсивность потока газа, его пропускают через сосуд с водой.
3. Микроскоп МБС-1, 2, 9, 10. Осеменение маток проводят при увеличении в 16 раз.
4. Стол лабораторный с гладким покрытием, облегчающим стерилизацию его поверхности.
5. Стулья винтовые лабораторные со спинкой.
6. Лампа бактерицидная для дезинфекции окружающего воздуха.
7. Термостат для непродолжительного сохранения осемененных маток.
8. Электрокалорифер для поддержания в лаборатории температуры воздуха 25...28°С.
9. Кондиционер БК-1500 для регулирования микроклимата.
10. Энтомологические садки для содержания трутней.
11. Клеточки Титова для содержания в них маток до и после осеменения и подсадки их в пчелиные семьи или отводки.
12. Рамки прививочные и рамки-питомники для вывода и сохранения маток в период осеменения и после него в семьях-воспитательницах.
13. Бюксы для хранения дезинфицирующих растворов.
14. Сверла для пробок (набор) для изготовления резиновых мембран — составной части шприца.
15. Пинцеты, скальпели, ножницы.
16. Вата, марля, полотенце для протирания и проведения дезинфекции.
17. Халаты белые (должны находиться только в лаборатории).
18. Физиологический раствор для шприца.
19. Спирт-ректификат 96%-ный и йод для дезинфекции.
20. Клей БФ-6 для приклеивания меток к маткам.
21. Тетрадь для записей.
Перед началом работы по осеменению пчелиных маток ежедневно проводят тщательную уборку помещения и дезинфекцию воздуха бактерицидным облучателем в течение 10 мин.
Техника инструментального осеменения пчелиных маток. Осеменяют неплодных маток в возрасте 6—13 дней, что соответствует срокам при их естественном спаривании. Трутни становятся половозрелыми в возрасте старше 14 дней.
Из семьи-воспитательницы вынимают питомник с матками, размещенными в клеточках, и приносят в лабораторию. Трутней в хорошую погоду залавливают в садок в период их активного лета, с 12 до 16 ч. В нелетное время половозрелых трутней набирают непосредственно с крайних сотов гнезда. В лаборатории, если трутни не летали, дают им возможность облететься. Это позволяет им очиститься от фекалий, они легче выворачивают эндо-фаллус.
Перед началом отбора спермы у трутней готовят шприц. Физиологическим раствором (0,9%-ный NaCl) заполняют втулку шприца и ввинчивают наконечник до плотного примыкания к резиновой мембране. В наконечник втягивают небольшой пузырек воздуха, который отделяет жидкость от набираемой спермы. Чтобы вызвать выворачивание эндофаллуса и эйякуляцию, трутней берут за голову и грудь с вентральной стороны пальцами левой руки. Часть брюшка, прилегающую к спине, раздражают или слегка сдавливают пальцами правой руки. Эта операция вызывает сокращение брюшных мышц и частичное, а иногда и полное выворачивание полового органа и эйякуляцию трутня. Если произошло частичное выворачивание эндофаллуса (полового органа), брюшко трутня сжимают от передней части к задней, пока не появится сперма. При полном процессе выворачивания эндофаллуса сперва выделяется сперма кремового цвета, а затем белый мукус (рис. 15).
Рис. 15. Отбор спермы у трутня
Трутня, совершившего эйякуляцию, подносят к наконечнику шприца, поверхностью семенной жидкости касаются кончика капилляра, и по мере оттягивания поршня она входит в него. Следует избегать засасывания мукуса, так как он быстро свертывается и образует пробку, останавливая прохождение спермы. Когда подносят следующего трутня, из наконечника спускают капельку спермы предыдущего, чтобы она соединилась с новой порцией, и втягивают ее в шприц. Для заполнения наконечника необходимо отобрать сперму от 6—10 трутней. Ее отбор и наполнение шприца проводят под микроскопом при увеличении в 8 раз. Чтобы сперма в шприце не высыхала, столбик поднимают и набирают каплю физиологического раствора.
После набора спермы в шприц начинают готовить матку. Перед осеменением ее выпускают на окно, где она совершает облет и очищает кишечник от каловых масс. Затем матку заставляют войти в трубку такого же диаметра, как и маткодержатель, противоположный конец которого закрывают пальцем. Достигнув закрытого конца, матка пятится назад, и в это время к открытому концу трубки приставляют маткодержатель, в который она перемещается. Когда матка достигнет суженной части маткодержателя, из которого должны выступать три последних брюшных сегмента, ее фиксируют пробкой с поступающим углекислым газом. Ее задние ножки должны оставаться внутри. Затем матку укрепляют в блоке маткодержателя и анестезируют углекислым газом.
Из баллона углекислый газ поступает в сосуд с водой по резиновому шлангу через редуктор. Это позволяет лучше регулировать течение газа по воздушным пузырькам. Из сосуда с водой углекислый газ проникает в резиновый шланг, на конец которого прикреплена пробка, фиксирующая матку в маткодержателе. В потоке углекислого газа она быстро успокаивается. Очень важно правильно расположить ее в блоке. Центральная линия тела матки должна быть в одной плоскости с вентральным и жальным крючками. Шприц вводят точно по центральной линии.
Рис. 16. Раскрытие камеры жала у матки
Как только матка успокоится, приступают к раскрытию камеры жала (рис. 16, 17, 18). Вместе с аппаратом ее размещают в поле зрения микроскопа при увеличении в 16 раз. В правую руку берут вспомогательный крючок и вводят его в конец брюшка матки. Легким движением раздвигают стернит матки и вентральным крючком отводят его влево. Вспомогательный крючок перекладывают в левую руку и при его помощи жальным крючком отводят жало вправо, открывая камеру. В центре жала находится преддверие влагалища. Капилляр наконечника направляют к отверстию влагалища и легкими движениями водят его вперед-назад, чтобы отвести клапан, препятствующий его прохождению в непарный яйцевод. Затем капилляр вводят на глубину 1,5 мм.
Рис. 17. Раскрытая камера жала матки
Если не дойдя до нужной глубины начинает двигаться окружающая ткань, значит, капилляр попал в один из карманов преддверия влагалища, которые расположены с обеих его сторон. Если столбик семени не двигается, а воздушный пузырек между спермой и физиологическим раствором сжимается, значит, капилляр не попал в яйцевод. В этом случае шприц оттягивают назад для повторного введения, проверяют положение матки по отношению к шприцу и изменяют угол ее расположения. Осторожно впрыскивают сперму, освобождают матку из маткодержателя, кладут ее на столик микроскопа и, как только она начнет двигаться, помещают в клеточку. При необходимости ей дают корм и подсаживают молодых пчел.
Рис. 18. Введение шприца со спермой в половые органы матки
После осеменения всех маток питомник возвращает в семью-воспитательницу (рис. 19, 20). При двукратном осеменении повторные манипуляции проводят через 24 ч. Матки высокого качества при трехкратном осеменении получают 4 мм3 спермы за один раз. По окончании последнего осеменения матку, находящуюся в неподвижном состоянии, метят, приклеивая к грудке шеллаком или клеем БФ-6 фольгу определенного цвета. На осеменение одной матки затрачивают в среднем 10 мин.
Рис. 19. Содержание осемененных маток в семье-воспитательнице
Дезинфекция инструментов. Учитывая, что сперма и мукус являются идеальной средой для развития возбудителей болезней, необходимо постоянно соблюдать гигиену.
Рис. 20. Инструментальное осеменение маток в лаборатории
При инструментальном осеменении могут передаваться такие заболевания, как паралич (черная болезнь) и септицемия, вызывающая, распад тела особей. При попадании инфекции гибнут целые партии осемененных маток. Поэтому поверхность рабочего стола регулярно протирают моющими средствами и спиртом. Техники-осеменаторы тщательно моют руки и протирают их спиртом. После осеменения пяти маток капилляр промывают от остатков спермы и дезинфицируют 96%-ным спиртом с добавлением 0,1%-ного йода. Крючки и пинцеты дезинфицируют после осеменения каждой матки.
По окончании работы тщательно чистят и дезинфицируют все инструменты, особенно капилляр шприца. Его промывают от остатков спермы, прочищают тонкой проволокой и снова промывают и дезинфицируют. Ни один инструмент, предназначенный для осеменения, не используют в других целях.
Хранение спермы. При инструментальном осеменении пчелиных маток важное значение имеет разбавление и сохранение спермы трутней. Одним из первых пытался это сделать Лейн (1886). С тех пор были испытаны различные типы физиологических растворов. Несмотря на то что спермин трутней живут в семяприемнике матки в течение нескольких лет, лишь незначительный успех был достигнут в изучении возможности консервирования спермы вне организма. Большинство исследователей пришли к выводу, что срок длительности жизни сперматозоидов исчисляется от 10 мин до 3 ч при температуре 8...46°С.
Джейкокс (1960) изучал действие высушивания и различных разбавителей на выживаемость спермиев трутней медоносной пчелы. Он доказал, что образцы спермы, высушенные на воздухе в течение 3, 6 и 9 мин, содержали соответственно 60, 10 и 1% подвижных сперматозоидов после реактивации раствором Бекера. Сперматозоиды, разбавленные различными растворами, жили 34 дня, в то время как неразбавленная сперма сохранялась в капиллярах 5—10 дней.
Тейбер и Блюм (1960) установили, что сперма трутней, помещенная в капилляры, при комнатной температуре оказалась жизнеспособной 28 дней.
Савада и Чанг (1964) исследовали выживаемость сперматозоидов при низких температурах и выявили, что несколько сперматозоидов от эйякулята и более чем половина в семенных пузырьках и спермоприемнике были подвижными после замораживания до 79°С, даже без обработки глицерином.
Максимальный период хранения спермы медоносной пчелы был 12—16 нед при температуре 24...25°С (Пул и Тейбер, 1969).
Оплодотворяющая способность спермы, хранившейся в капиллярах, обработанных сульфастрептомицином и тетрациклином, сохранялась 16—18 нед, в то время как обработанная пенициллином — до 10 нед. Период хранения спермы, обработанной стрептомицином, был увеличен до 32 нед при температуре 13...15° С.
Харбо (1973) разбавлял сперму физиологическим раствором из расчета 85 и 15% и хранил ее при температуре 14°С с отклонениями ±1°С. Из 6 маток, осемененных этой спермой, хранившейся 150 дней, 3 откладывали оплодотворенные яйца.
Мельниченко и Вавилов (1975) провели опыты по сохранению спермы трутней в жидком азоте (t — 196 °С) до 3 мес. При осеменении ею маток часть из них откладывала оплодотворенные яйца. Исследования в этом направлении продолжаются.
Использование осемененных маток. Закончив инструментальное осеменение, маток выдерживают в клеточках в семье-воспитательнице 5—7 дней. В этот период у них проходят процессы перехода спермиев в семяприемник, усиления функции яичников и созревания яиц. Кроме того, в указанное время происходит отход случайно поврежденных в процессе осеменения маток. В результате такой выдержки у инструментально осемененных маток пропадает стремление к вылетам на естественное спаривание, поэтому отпадает необходимость в зарешечивании летков, мешающем нормальной работе пчел.
Успех инструментального осеменения определяется количеством маток, начавших откладку оплодотворенных яиц. Их содержание в семьях-воспитательницах при искусственном осеменении позволяет получать более 90% маток, нормально откладывающих оплодотворенные яйца, и исключает все затраты, связанные с формированием и содержанием нуклеусов.
Инструментально осемененных маток используют для подсадки или замены в пчелиных семьях (отводках). В сильных пчелиных семьях при замене старых маток временные отводки формируют в верхних корпусах ульев или сбоку гнезда в ульях-лежаках. После приема маток им предоставляют возможность начать интенсивную откладку яиц, а затем отводки соединяют с основными семьями, отобрав от них предварительно своих маток.
По продолжительности жизни инструментально осемененные пчелиные матки не отличаются от естественно спарившихся. На пасеках НИИ пчеловодства семьи с такими матками имеют большое количество сплошного расплода и к медосбору наращивают до 5 кг пчел, несмотря на то что от большинства из них в весенний период формируют отводки. Продуктивность пчелиных семей, участвующих в медосборе, достигала 50 кг меда.
В последние годы этот метод внедряется не только в научных учреждениях, связанных с пчеловодством, но и в специализированных пчелоразведенческих хозяйствах, ведущих селекционную работу. При НИИ пчеловодства организована ежегодная стажировка специалистов по освоению инструментального осеменения пчелиных маток. В настоящее время решается вопрос об организации производства партии аппаратов на одном из заводов страны.
В будущем предстоит организовать пункты инструментального осеменения пчелиных маток на базе пчелоразведенческих совхозов и межхозяйственных пчеловодческих предприятий, где по заявкам хозяйств и пчеловодов-любителей можно будет получать маток любого происхождения. Это позволит в разных зонах страны создать массивы районируемых пород пчел и широко использовать перспективные варианты промышленного скрещивания.
Многих читателей интересуют вопросы изготовления и приобретения приспособлений для инструментального осеменения маток. В ближайшее время будет организовано производство партий таких аппаратов на одном из заводов Киева. Однако в первую очередь будет удовлетворяться потребность научно-исследовательских учреждений и хозяйств, занимающихся разведением пчел. Тем, кто проявляет интерес к искусственному осеменению маток, следует иметь в виду, что приобретением аппарата этот вопрос не решается. Искусственное осеменение требует высокопрофессиональных навыков и дорогого лабораторного оборудования, поэтому его нецелесообразно использовать в условиях обычной любительской пасеки.