МАТЕРИАЛ ДЛЯ ЛАБОРАТОРНО-ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЙ

Занятие двенадцатое

Цель занятия. Освоить методику количественного определения в прополисе механических примесей и воска.

Оборудование и материалы. Весы ВЛТ-1 кг-1 с разновесом. Электромельница. Сушильный шкаф-термостат. Баня водяная. Термометр со шкалой от 0 до 100° С и ценой деления ГС. Воронка стеклянная коническая. Чашка Петри. Стаканы химические на 250 и 50 мл. Палочка стеклянная. Ножницы. Бумага фильтровальная. Спирт этиловый ректификованный. Эфир диэтиловый. Спирто-эфирная смесь 1:1. Образцы прополиса.

Порядок работы. Сначала учащиеся оценивают образцы прополиса органолептически по цвету, запаху, вкусу, консистенции, структуре, выявляют механические примеси и содержание воска. После этого они приступают к выполнению анализов.

Анализ на содержание механических примесей. Отвесив в стаканчик 10,00±0,01 г размельченного на электромельнице прополиса, заливают его 30 мл спирто-эфирной смеси и настаивают в течение часа при комнатной температуре, периодически помешивая. Затем, нагрев содержимое стаканчика на водяной бане до 70°С, фильтруют его через бумажный фильтр. Осадок на фильтре порциями по 25 мл 6 раз промывают при той же температуре спирто-зфирной смесью. Фильтрат и промывную жидкость собирают в стакан на 250мл, а фильтр помещают в чашку Петри и сушат в шкафу при 70° С до постоянной массы/Содержание механических примесей (М) вычисляют по формуле:

M=(P₂-P₁)100/(P₄-P₃)

где P₁ — масса фильтра (г); Р₂ — масса фильтра с механическими примесями на нем после сушки; Р₃ — масса тары; Р₄ — масса тары с прополисом; 100 — коэффициент пересчета в проценты.

Полученные при этом данные сопоставляют с нормами стандарта.

Анализ на содержание воска. Фильтрат и промывную жидкость от предыдущего определения охлаждают до комнатной температуры и оставляют до выделения воска. Воск собирают на фильтр и сушат на нем до постоянной массы при 40—50°С (лучше в токе сухого воздуха). Содержание воска в прополисе (В) рассчитывают по формуле:

B=(P₆-P₅)100/(P₄-P₃),

где Р₅ — масса фильтра; Р₆ — масса фильтра с воском после высушивания. Полученные данные сопоставляют затем с нормами стандарта.

Пример. Допустим Р₁ = 6,021 г, Р₂ = 7,733 г, Р, = 50,18 г Р₄ = 60,27 г, Р₅ - 5,885 г и Р₆ - 8,863 г. Отсюда:

1) М = (7,733 - 6,021)100/(60,27 - 50,18) = 171,2/10,09 = 17%

2) В = (8,863 - 5,885)100/(60,27 — 50,18) = 297,8/10,09 = 29,5%

Занятие тринадцатое

Цель занятия. Освоить методику определения восстановительной способности («окисляемости») прополиса.

Оборудование и материалы. Весы АДВ-200М и разновес. Электромельница. Секундомер. Ножницы. Воронки стеклянные конические. Колбы конические на 250 и 150 мл. Стакан химический с носиком на 50 мл. Цилиндр мерный на 100 мл. Пипетки емкостью 10, 5, 2 и 1 мл. Глазная пипетка. Стеклянные палочки. Калька. Бумага фильтровальная. Вода дистиллированная. Спирт этиловый ректификованный. Кислота серная, 20%-ная. Калий марганцовокислый, 0,1 н раствор. Образцы прополиса, охлажденного в течение 2 ч.

Порядок работы. На электромельнице измельчают прополис, имеющий температуру 3—10 °С, до частиц размером 0,1—0,2 мм или мельче. Отвесив на кальке 200,0 мг такого прополиса, переносят его в колбу на 250 мл, приливают туда 5,0мл этилового спирта и оставляют стоять на 1 ч. Затем, добавив в колбу 100,0 мл воды и перемешав содержимое стеклянной палочкой, фильтруют его через бумажный фильтр. В колбу на 150 мл помещают 10,0 мл фильтрата, приливают туда 90,0 мл воды, и все перемешивают. После этого отбирают в 50-миллилитровый стаканчик 2,0 мл раствора и прибавляют к нему 1,0 мл серной кислоты. Помешав содержимое стаканчика в течение минуты, вносят в него при помешивании одну каплю раствора марганцовокислого калия и одновременно включают секундомер. Время исчезновения розовой окраски отмечают. Реакцию проводят при 18—20 СС, используя только свежеприготовленный раствор прополиса. На основании полученных данных делают вывод о качестве прополиса и его соответствии требованиям стандарта.

Занятие четырнадцатое

Цель занятия. Освоить метод оценки качества маточного молочка.

Оборудование и материалы. Весы ВЛА-200 г или АДВ-200М и разновес. Центрифуга лабораторная на 3000 об/мин. Ртутно-кварцевая лампа с фильтром УФС-3. Секундомер. Ступка фарфоровая с пестиком. Стаканы химические с носиком на 50 мл. Пипетки емкостью на 10, 5, 2 и 1 мл. Палочки стеклянные. Пипетка глазная. Калька. Вода дистиллированная, только что прокипяченная и охлажденная в закрытой колбе до комнатной температуры. Кислота серная, 20%-ная. Калий марганцовокислый 0,1 н. раствор. Маточное молочко или его препарат апилак, тщательно растертый в ступке.

Порядок работы. Отвесив на кальке 32,0 мг маточного молочка или 145,0 мг препарата, переносят его в стакан на 50 мл, прибавляют туда 10,0 мл воды, после чего содержимое в течение 5 мин перемешивают стеклянной палочкой.

Оценка восстановительной способности маточного молочка. Поместив 20,0 мл рабочего раствора в 50-миллилитровый стаканчик, вносят туда 1,0 мл раствора серной кислоты и круговыми движениями стаканчика содержимое в течение минуты перемешивают. Затем, помешивая его стеклянной палочкой, вносят в стаканчик каплю раствора марганцовокислого калия и одновременно включают секундомер. Время исчезновения розовой окраски (при 18—20°С) отмечают. Результаты сопоставляют с действующими нормами.

Оценка флуоресценции. Взяв пипеткой 5 мл рабочего раствора, помещают его в 50-миллилитровый стаканчик и доливают туда 20,0 мл воды. После перемешивания стеклянной палочкой содержимое стакана центрифугируют в течение 5—10 мин при 2000—3000 об/мин или отстаивают в течение часа. Затем около 2,0 мл осветленного раствора наливают в плоскую кювету из материала, пропускающего ультрафиолетовый свет и нефлуоресцирующего. Облучают кювету перпендикулярно ее плоскости светом при длине волны 366 нм и наблюдают флуоресценцию раствора, рассматривая его сверху в темноте после 10—15-минутной адаптации глаз. Цвет и интенсивность свечения раствора сравнивают с действующими нормами.