Занятие 4. Вскрытие пчелы-работницы. Органы пищеварения, дыхания, кровообращения, выделения; жалоносный аппарат

Порядок выполнения. Для вскрытия следует брать живых пчел-работниц, которых наркотизируют перед самым началом работы. При хранении пчел в спирту, формалине внутренние органы становятся хрупкими и непригодными для анатомирования Перед анатомированием подготавливают предметы оборудования, наркотизирующее вещество (хлороформ, серный эфир), жидкость, в которой проводят вскрытие. Из оборудования необходимы восковая ванночка (см. выше), глазные ножницы, препаровальные иглы (для игл лучше взять энтомологические булавки, вставив их в деревянные ручки), маленький пинцет, скальпель, энтомологические булавки для раскалывания внутренних органов. В качестве жидкости, в которой ведут вскрытие, рекомендуется пользоваться 30- или 50-градусным спиртом, так как вода не смачивает хитиновые волоски. Для получения спирта крепостью 30° к 100 см³ 96-градусного спирта добавляют 224 см³ воды, а для получения 50-градусного спирта к 100 см³ 96-градусного спирта добавляют 95,9 см³ воды. Замаривают живых пчел-работниц в морилке, заряженной хлороформом или серным эфиром; через 1—2 мин пчелы окажутся обездвиженными и готовыми для вскрытия. Их вытряхивают из морилки на лист бумаги. Далее, взяв пчелу большим и указательным пальцами левой руки, ножницами обрезают крылья и ноги, которые помешали бы вскрытию. После этого берут металлическую проволоку из латуни или меди длиной 15 см и толщиной около 0,5 см и один конец ее, около 2 см длиной, изгибают под прямым иглом. Изогнутый конец проволоки нагревают на газовой горелке (или на спиртовке) и опускают на воск ванночки. В образовавшуюся ложбинку с расплавленным воском пинцетом погружают пчелу-работницу приблизительно до половины толщины ее тела (рис. 105).

Рис. 105. Способ вскрытия пчелы: А — изогнутым в виде колена нагретым куском проволоки (а) расплавляется в середине ванночки воск; пинцетом захватывают пчелу (б), у которой предварительно обрезаны ноги и крылья, и опускают ее в расплавленную массу воска приблизительно до половины ее тела (Б); В и Г—показано, как вести надрез по спинным полукольцам брюшка (пунктирными линиями на спинке, груди и голове указаны направления, по которым следует вскрывать скальпелем или копьецом спинку груди и теменную часть головы)

Когда воск остынет и пчела окажется закрепленной в нем, наливают в ванночку раствор спирта (30- или 50-градусный) так, чтобы все тело пчелы сверху было покрыто жидкостью. Ванночку с пчелой ставят на предметный столик препаровальной лупы, находят фокусное расстояние, вводят один конец ножниц между 5-м и 6-м тергитами брюшка с правой стороны и делают надрез тергитов сзади к переднему концу брюшка. Доведя надрез до основания первого тергита брюшка, поворачивают ванночку по часовой стрелке и проводят надрез поперек основания переднего тергита справа налево. Затем ванночку снова поворачивают по часовой стрелке, чтобы положение пчелы изменилось на 180° по сравнению с исходным, и ведут надрез тергитов брюшка с правой стороны от переднего тергита к заднему. Дойдя до последнего тергита, опять делают поперечный надрез слева направо и таким образом замыкают надрез. Придав пчеле-работнице первоначальное положение, пинцетом и препаровальными иглами осторожно удаляют тергиты, начиная с последнего и постепенно доходя до переднего. Эту операцию надо выполнять с большой осторожностью, так как тергиты скреплены с кишечником многочисленными трахейными отростками. Последние лучше осторожно подрезать ножницами или удалять препаровальными иглами. Важно стремиться к тому, чтобы все надрезанные тергиты брюшка были удалены как одно целое. В противном случае сердце или спинной сосуд, расположенный под тергитами, окажется деформированным.

Отделив тергиты брюшка, их кладут в каплю жидкости на предметное стекло (предпочтительнее пользоваться стеклом с лункой посередине) и под лупой, а еще лучше под бинокуляром рассматривают и зарисовывают спинной сосуд в составе 5 камер, спинную диафрагму, края которой прикреплены к тергитам. В стенке диафрагмы заметны мышцы (крыловидные), находящиеся вблизи сердца перикардиальные клетки кремового оттенка, а между спинным сосудом и тергитами — группа жировых клеток (рис. 106 и цв. табл. I, 1, 2, 6).

Затем осматривают кишечник, сначала в естественном положении, после чего пинцетом и препаровальными иглами расправляют его, отводят несколько влево (рис. 106), раскалывают булавками, рассматривают его строение и зарисовывают. Обращают внимание на то, что медовый зобик с частью пищевода, относящиеся к передней кишке, находятся в брюшке; сквозь стенку зобика просвечивает головка клапана, рукав которого спускается в среднюю кишку. Главный отдел кишечника — средняя кишка (рис. 106, цв. табл I, 1 — и цв. табл. II, 2, 3) в естественном положении имеет спирально извитую форму, стенки ее характеризуются складчатостью. За средней кишкой располагается задняя, начинающаяся тонкой и заканчивающаяся прямой кишкой, в стенке последней можно обнаружить шесть валиков — ректальные железы.

В переднюю часть тонкой кишки впадают многочисленные (более сотни) тонкие длинные извитые трубочки — мальпигиевы сосуды, органы выделения (рис. 106, цв. табл. I, У и цв. табл. II, 2). Для рассмотрения пищевода, находящегося в грудном отделе, скальпелем срезают тергальную часть груди и постепенно выщипывают толщу грудной мускулатуры. Только после этого он обнаруживается в виде узкой трубки, простирающейся вперед до головного отдела и переходящей сзади вместе с медовым зобиком в брюшко.

Среди грудной мускулатуры залегают парные грудные ветви нижнегубной железы. Осторожно вскрыв скальпелем и препаровальными иглами хитиновую стенку головы, обнаруживают гипофарингеальные и заднеголовные железы (рис. 106). Расправив гипофарингеальные железы, их выводят из головы вместе с гипофарингеальной пластинкой, кладут в каплю жидкости на предметное стекло и рассматривают под лупой, бинокуляром или малым увеличением микроскопа. Можно также изготовить временный препарат из заднеголовных и грудных ветвей нижнегубной железы.

Рис. 106. Вскрытая пчела; кишечник отведен влево: пщ — пищевод; мз — медовый зобик; кл — клапан; ск — средняя кишка; пк — прямая кишка; рж — ректальные железы; мс — мальпигиевы сосуды; за — зрительные доли мозга; пг — простые глаза; гпж — гипофарингеальные железы; згж — заднеголовные железы; грж — грудные железы

По удалении кишечника рассматривают трахейные воздушные мешки, расположенные в брюшке, груди и голове, и многочисленные отходящие от них трахейные стволы с мелкими разветвлениями трахей (цв. табл. I, 2). Отделив небольшой участок трахейного ствола, перемещают его в каплю жидкости на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и рассматривают под малым и сильным увеличением микроскопа. Зарисовывают общий вид трахеи с ее ответвлениями, эпителиальный наружный слой и хитиновую спираль в стенке трахеи (цв. табл. I, 4).

Далее в конце брюшка находят хитиновые части жалоносного аппарата и простирающуюся вперед большую нитевидную ядовитую железу, начинающуюся в виде развилки и впадающую у основания жала в резервуар. Извлекают (пинцетом) весь жалоносный аппарат, изготовляют из него микроскопический препарат, рассматривают и зарисовывают под лупой, бинокуляром, микроскопом его строение, пользуясь рисунком 20.