ПАЛМБАХА С. Э. (СССР) - ИЗУЧЕНИЕ АНТИМИКРОБНОГО ДЕЙСТВИЯ ПРОПОЛИСА НА МИКРОФЛОРУ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА

Длительное применение антибиотиков и сульфамидных препаратов часто вызывает появление резистентных форм патогенных микроорганизмов. Это побуждает к изысканию новых лекарственных препаратов, не уступающих им по силе и широте спектра действия.

Исследования, проводимые с прополисом, указывают на эффективность его применения в медицине: дерматологии, хирургии, стоматологии, отоларингологии, гинекологии. Препараты из прополиса можно с большим успехом применять также в ветеринарии при лечении ящурных поражений, некробациллеза, энзоотической бронхопневмонии, токсической диспепсии, паратифа, стафилококковых маститов и инфицированных ран.

На основании результатов экспериментальных исследований и практического применения препаратов, приготовленных из прополиса, в Казанском ветеринарном институте разработаны "Рекомендации по применению прополиса в ветеринарии" (В. П. КИВАЛКИНА, И. Ф. КАЗАКОВ, 1962), в которых предусматривается пероральное применение прополиса как лечебного, так и профилактического средства при желудочно-кишечных и легочных заболеваниях.

В связи с этим важное практическое значение имеет изучение действия прополиса на микрофлору желудочно-кишечного тракта. Только всестороннее комплексное изучение различных свойств прополиса создаст предпосылки для его использования в качестве сырья для промышленного производства лекарственных препаратов.

Целью нашей работы являлось изучение влияния прополиса in vitro и in vivo на основных представителей микрофлоры желудочно-кишечного тракта.

Антимикробное действие прополиса in vitro определяли в отношении культур кишечных палочек, энтерококков, молочнокислых бактерий, выделенных в процессе бактериологического исследования содержимого толстого отдела кишечника животных, а также музейных штаммов золотистого стафилококка (эталонный штамм 209 и лабораторные - 39 и ВМ) и ацидофильных бактерий.

Ввиду того, что антимикробные свойства прополиса, собранного на пасеках Латвийской ССР, никем до сих пор не изучались, мы исследовали девять образцов прополиса, собранного в трех разных зонах и шести районах Латвийской ССР. Определяли бактерицидное действие нативного прополиса, бактериостатическое - прополиса, введенного в питательные среды, бактерицидное и бактериостатическое действие спиртового экстракта прополиса. Установили содержание воска в исследуемых образцах прополиса и сухого вещества в его спиртовых экстрактах.

Результаты исследований показали, что все образцы прополиса обладают выраженной антимикробной активностью. Бактерицидное действие нативного прополиса как в отношении золотистого стафилококка, так и кишечной палочки проявлялось через 2-4 часа, а энтерококка - 1-3 часа. 20%-ный спиртовый экстракт прополиса, разведенный дистиллированной водой (1:5) вызывал гивель энтерококка на хлопчатобумажных тестобъектак через 10-15 минут, золотистого стафилококка - 20-30 и кишечной палочки - 35-40 мин. В мясопептонном агаре рост золотистого стафилококка прекращался после внесения на 100 мл среды 0,05-0,25 мл 20%-ного спиртового экстракта прополиса, энтерококков - 0,25-0,5 и кишечной палочки - 3,9 мл, а в мясопептонном бульоне, соответственно - 0,5-1,5; 1,5-2 и 5-10 мл.

Бактериостатическое действие в мясопептонном агаре наблюдалось в отношении золотистого стафилококка после введения в 100 мл среды 0,05-0,025 г прополиса, энтерококка - 0,1-0,5 и кишечной палочки 6-7 г, а в мясопептонном бульоне соответственно 0,1-0,25; 0,5 и 7-9.

Бактериостатическое действие молока в отношении молочнокислых бактерий проявлялось после добавления к нему 4-6 г нативного прополиса, а также после добавления 3-б мл 20%-ного спиртового экстракта прополиса.

Исследованные нами образцы прополиса содержали 1,5-31,1% воска в 1 мл 20%-ного спиртового экстракта - 0,101-0,154 г сухого вещества. В спиртовом экстракте, приготовленном из образца прополиса, содержащего 1,5% воска, находилось 0,147 г сухого вещества в 1 мл, а в экстракте, полученном из прополиса, содержащего 31,1% воска - 0,103 г в 1 мл.

Изучение влияния перорального применения водноспиртовой эмульсии прополиса на кишечную микрофлору проводили в 1968-1969 гг. на 39 поросятах крупной белой породы 30-дневного возраста и 20 взрослых кроликах породы шиншилла.

Животным в течение 30 дней перорально вводили 20%-ный спиртовой экстракт прополиса, в виде 0,5 и 5%-ной водноспиртовой эмульсии в дозе 4 мл на килограмм живого веса (0,5%-ная концентрация соответствовала в рекомендациях указанной дозе).

Бактериологическому исследованию подвергали пробы кала, взятые из прямой кишки животных с десятидневными промежутками 5 раз до дачи препарата, 3 раза - в период дачи и 2 раза - после дачи. Определяли количество кишечных палочек, ацидофильных бактерий, энтерококков, клостридиум перфрингенс. У кроликов, кроме указанных групп микроорганизмов, определяли общее количество бактерий растущих в аэробных условиях на обычном мясопептонном агаре. Для выращивания кишечных палочек применяли молибденфуксин, сульфидный агар, энтерококков - среду с ази дом натрия, ацидофильных бактерий - среду, приготовленную по прописи Элликер, и клостридиум перфрингенс - среду Вильсона-Блера.

В опытах на поросятах бактериологическому исследованию были подвергнуты 400 проб калл и сделано 3200 посевов, на кроликах - 200 проб кала и 1600 посевов.

В процессе изучения влияния пероральной дачи прополиса на микрофлору желудочно-кишечного тракта мы установили, что максимальное количество бактерий из группы кишечных палочек и ацидофильных бактерий у контрольных и опытных групп наблюдалось у 30-дневных поросят, у поросят 70-дневного возраста количество тех и других бактерий резко уменьшилось. У поросят 80-дневного возраста количественное содержание бактерий из группы кишечных палочек относительно стабилизировалось. Количество же ацидофильных бактерий продолжало уменьшаться до конца исследования. Содержание энтерококков и клостридиум перфрингенс в разные сроки опытов колебалось в сторону увеличения или уменьшения. Несмотря на уменьшение содержания кишечных палочек, они оставались преобладающей группой микроорганизмов до конца опыта. Второе место по численности занимали ацидофильные бактерии, а к концу исследования - энтерококки.

Результаты бактериологического исследования кала кроликов показали, что среди исследованных групп микроорганизмов количество бактерий, растущих на мясопептонном агаре в аэробных условиях на протяжении всего исследования значительно превосходило суммарное число кишечных палочек, ацидофильных бактерий и энтерококков. В течение всего периода исследования содержание этих бактерий колебалось в сторону увеличения или уменьшения, последнее при этом имело более выраженную тенденцию. Среди изучаемых физиологических групп микроорганизмов преобладающей группой бактерий была группа кишечных палочек, второе место занимали ацидофильные бактерии, третье - энтерококки. Клостридиум перфрингенс удалось выделить только из отдельных проб кала в виде единичных колоний.

В процессе бактериологического исследования нами наблюдались большие колебания в содержании микроорганизмов у отдельных индивидуумов внутри одной и той же группы, находившихся в одних и тех же условиях. Количественные изменения в составе микрофлоры кала у подопытных поросят и кроликов, выявленные при бактериологическом исследовании, не зависели от влияния водноспиртовой эмульсии прополиса, так как они имели место и у животных контрольных групп. Статистическая обработка показала, что количественные изменения в содержании микроорганизмов при внутреннем применении прополиса недостоверны. Это позволяет сделать вывод, что длительное пероральное применение водноспиртовой эмульсии прополиса не приводит к дисбактериозу, что имеет важное практическое значение.

ЛИТЕРАТУРА

КИВАЛКИНА В. П. и КАЗАКОВ И. Ф., 1962 - Временные рекомендации по применению прополиса в ветеринарии. М.