ЯНЕШ К., БУМБА В. (ЧЕХОСЛОВАКИЯ) - К ВОПРОСУ О СОСТАВЕ ПРОПОЛИСА
В лаборатории косметики Научно-исследовательского института производства жиров, в Праге, мы занимались между прочим и изучением состава и свойств прополиса. И так как, по нашему мнению, мы пришли к интересным выводам, мы хотели бы кратко изложить эволюцию проведенных опытов.
Во первых, мы изучали свойства экстрактов, полученных при помощи разных растворителей в 11 пробах прополиса; исследования проводили в ультрафиолетовой зоне спектра для оценки возможностей использования экстрактов прополиса, как фильтров солнечного излучения. Выводы из этих опытов следующие:
а) Самые лучшие результаты получены с экстрактом прополиса на основе этилового спирта (отношение 1:10, экстракция 24 часа);
б) Во всех экстрактах в пределах от 200 до 370 пц была максимальная характеристика в длинах волн 235, 285 и 314 nμ - даже если обнаружены некоторые различия в зависимости от количества.
в) Действие прополисных экстрактов не зависит от их цвета.
Это свойство явно вызвано больше всего производными коричной кислоты и некоторыми соединениями галловой кислоты.
Позже мы попытались выделить эти действующие начала. Во время этого процесса нам удалось получить характерную кристаллическую смесь, которую мы подробно изучили.
Опыты
Из 150 г прополиса мы удалили воск при помощи нагревания в 350 мл воды. Эту процедуру мы повторили два раза до полного устранения пчелиного воска. Остаток дистиллировали в водяном паре, получив таким образом 3 л дистиллированного вещества. После его фильтрации произвели вытяжку этиловым спиртом в несколько этапов. Из общего количества экстракта на каждом этапе удаляли слой эфира при помощи дистилляции, получив в итоге около 50 мл. В течение 20-24 часов, иногда даже раньше, из этого раствора выделялись характерные кристаллы, покрытые масляной оболочкой. Эти кристаллы растворили в смеси этилового эфира - петролейного эфира в пропорции 1 : 1, затем кристаллизовали снова. Точка плавления этого вещества была 115-118°Ц. При микроскопическом исследовании, кроме кристаллов установлено наличие капель похожих на масляные. (Кристаллическое вещество, полученное в результате четырехкратной дистилляции в водяном паре, было перемешано и подвержено фракционированной сублимации. В результате этого процесса получили 3 фракции. Первая щ них содержала, в основном масляную составную, вторая была кристаллической, а третья содержала много примесей.
Вторая фракция была снова кристаллизована в эфире и полученное таким образом вещество имело точку плавления 122°Ц. Вещество (анализировали при помощи инфракрасной спектроскопии и магнитного ядерного резонанса и определили как бензойную кислоту. Это вещество проверили в дальнейшем при помощи тонкослойной хроматографии в трех разных системах:
а) в системе ацетон - петролейный эфир 1:3 на силуфоле, по методу Лимана (1). Значение Rf соответствовало стандартному значению бензойной кислоты, 0,35;
б) в системе этанол-вода-аммоний (25%) 25:3:4 на силуфоле по методу Браун-Геенена (2) значение Rf соответствовало стандартному значению бензойной кислоты;
в) в системе этиловой кислоты петролейяого эфира 3:7 величина Rf соответствовала стандартной величине бензойной кислоты (Rf 0,7).
Другие определения были проведены при помощи хроматографии на декстриновом геле, и наличие бензойной кислоты было доказано сравнением полученных объемов со стандартной величиной. Во время этого процесса установлено, что фракция № 2 содержала, кроме бензойной кислоты и небольшое количество неизвестного вещества. Наличие этого вещества было установлено и при тонкослойной хроматографии во всех вышеупомянутых системах. Речь идет об ароматическом веществе, которое при 254 пц имеет сильную флюоресценцию светло-синего цвета. Из наблюдений, проведенных до сих пор, можно сделать вывод, что мы имеем дело с ароматическим, одноядерным веществом с моллекулярным весом выше, чем у бензойной кислоты. Его наличие было установлено в разных количествах, во всех трех фракциях, полученных в результате фракционированной сублимации. В первой и третьей фракциях эти два вещества, соответственно бензойная кислота и флюоресцентное вещество, сопровождаются большим количеством других элементов. В дальнейшем мы займемся определением вещества, которое сопровождает бензойную кислоту для установления, идет ли речь об уже известном веществе, входящем в состав прополиса, или о веществе которое предстоит определить.
В своих работах мы доказали наличие в прополисе бензойной кислоты. Из 150 г прополиса получили 1-2 г кристаллической смеси. Из 150 г прополиса получили 1-2 г кристаллической смеси, которая содержит почти 50% (бензойной кислоты. Количество полученной кристаллической смеси колебалось в зависимости от соотношения воска и битумов в разных образцах изученного прополиса.
Наличие в прополисе бензойной кислоты можно объяснить тем, что он находится в природе в большом количестве растений (чернике, тополевых почках и др.), из которых пчелы собирают его вместе с другими веществами.
Учитывая это влияние бензойной кислоты на микроорганизмы, можно сделать вывод, что она способствует вместе с другими веществами бактериостатическому и бактерицидному действию прополиса.
ЛИТЕРАТУРА
1. LYMAN R. L. et al. J. Org. Oham. 23. 756 (1958)
2. BRAUN D., Geenen H. J. Chromatography 9, 363 (1962)