ЧИЖМАРИК И., МАТЕЛ И. (ЧЕХОСЛОВАКИЯ) - ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ПРОПОЛИСА, ИЗОЛЯЦИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ 4-ОКСИ-3-МЕТОКСИ КОРИЧНОЙ КИСЛОТЫ ИЗ ПРОПОЛИСА

Для дальнейшего успешного биохимического, фармакологического и клинического исследования прополиса следует, безусловно, знать его точный химический состав. До сих пор найдено в прополисе в общем 19 веществ разной химической структуры.

В прополисе описаны коричная кислота и коричный алкоголь, хризия (КЮС-ТЕНМАХЕР, ЖОБЕР) и ванилин (ДИТРИХ). Советский исследователь ПОПРАВКО нашел в прополисе изоваиилин, акацетин, кемферид, рамноцитрин, кверцетин, пиностробин, 5-окси-7,4-диметоксифлавонон; 5,7-диокси-3,4-диметоксифлавон, 3,5-диокси-7,4-диметокоифлавон и 5-окси-7,4-диметоксифлавон. Мы выделили из прополиса и идентифицировали кофейную кислоту, а французские исследователи под руководством V. R. VILLANUEVA идентифицировали в прополисе галанпин, хризин, тектохризин, изальлинин и пиноцембрин.

Предварительные опыты и результаты бумажной и тонкослойной хроматографии показывают, что прополис содержит еще целый рад до сих пор не идентифицированных соединений. Поэтому в своем исследовании мы стремились их определить.

Анализ проводили по следующей схеме. Экстракция: 1000 г прополиса экстрагировали в 2л безводного бензола без нагревания в течение двух дней. После фильтрации раствор бензола был удален дистилляцией в вакууме и осадок экстрагирован одним литром (безводного этилового спирта. Экстракцию вели в течение 24 часов без нагревания. Полученный красно-коричневый раствор подвергли дистилляции для полного удаления жидкости и экстр ашровали в 500 мл холодной воды в течение 3 дней. Остаток после экстракции перекристаллизировали в горячей воде. Выделившиеся кристаллы отделили и растворили в 10 мл безводного спирта. Полученный раствор был нанесен на тонкий слой оиликагеля и хроматографирован в системе бензол-диоксан-уксуная кислота в соотношении 90:25:4. С помощью облучения ультрафиолетовыми лучами было установлено, что хроматограмма содержит 5 соединений. Нами выделенная и описанная кофейная кислота имела полосы при R_f=0,24.

В зоне с R_f = 0,50 находилось вещество, которое имело синюю флуоресценцию под ультрафиолетовыми лучами и эту зону экстрагировали этиловым спиртом, упаривали и кристаллизовали.

Из 15 таким образом полученных зон спиртовой экстракт был удален сушкой полностью. Полученные мелкие кристаллы после перекристаллизации в горячей воде имели точку плавления 168°. Так как вещество с такой точкой плавления не было еще обнаружено в прополисе, мы сосредоточились на его идентификации.

Идентификация. Спиртовый раствор выделенного вещества показал характерные химические реакции на присутствие карбоксильной и шдроксильной групп, двойной связи и реакцию, доказывающую присутствие метокоигруппы.

При исследовании спиртового раствора в ультрафиолетовых лучах мы определили максимум абсорбции при длине волны 322 тм.

По результатам исследования этого вещества с помощью бумажной и тонкослойной хроматографии, инфракрасного света и спектра ядерного магнитного резонанса мы определили, что оно является 4-окси-3-метокcи коричной кислотой, которая в химической литературе называется также феруловой и имеет следующую cтруктурную формулу;

Правильность предположения была доказана исследованием величины R выделенной кислоты и контрольного раствора кислоты. Оба вещества имели одинаковые величины R_f, характер поглощении ультрафиолетовых и инфракрасных лучей.

Фармакологическое действие. Феруловая кислота отличается антибактериальным действием (грамположительным и грамотрицательным) и способствует бактерицидному и бактериостатичеокому действию прополиса, что описано уже несколькими авторами.

Кроме того, проявляется в значительной степени вяжущее действие используемое при лечении трудно заживающих ран при помощи мази, приготовленной из спиртового раствора прополиса, и желчевыделительное действие, описанное в 1938 г.

Феруловая кислота находится главным образом в млечном соке корня Ferula foetida, в смоле Орораnах chironium, Catalpa ovata и в Ajugaiva. Кроме того имеется также в Equisetum hiemala, Dahlia variabilis и Berberis amurensis.

В прополис феруловая кислота попадает в основном из смолы Pinus laricis где эта кислота была найдена еще в 1876 г. из Pinus сеmbra смолы елей.

С этих растений пчелы очень интенсивно, главным образом, осенью собирают смолу, как основную составную часть прополиса. Пчела может эту кислоту синтезировать и в качестве вторичного продукта расщеплении гликозидов растений в которых феруловая кислота присутствует как агликоя.

Ввиду того, что в пыльце эта ненасыщенная кислота еще не найдена обнаружение ее в прополисе служит важным аргументом против теории Кюстенмахера и (В пользу того мнения, что прополис собирают пчелы из смолистых выделений почек и коры разных растений.