ХАРАГСИМ О., ВЕСЕЛИ В. (ЧЕХОСЛОВАКИЯ) - ВЛИЯНИЕ ПРОПОЛИСА НА ПОДВИЖНОСТЬ СПЕРМАТОЗОИДОВ ТРУТНЕЙ in vitro

В течение последнего десятилетия прополис стал предметам пространных исследований (химического и фармакологического характера. Хотя это вещество известно еще с давних пор, но до нынешних дней не существует однозначного мнения относительно его природы, состава и способа Образования. Различные его качества также в достаточной мере не изучены и в еще меньшей мере используются ценные вещества, входящие в его состав. Некоторые исследования показали, однако, что прополис влияет на жизнедеятельность пчел в улье и что его значение для пчеловодной практики несправедливо недооценивается.

Нашим докладам мы намереваемся обратить внимание на до сих пор неизвестное свойство прополиса, обнаруженное во время изучения подвижности спермиев трутня медоносной пчелы.

Изучение биологии спермиев трутня стало основной проблемой после введения техники искусственного осеменения маток. Еще ЛЕИДИГ (1867 г.) и позднее БРВСЛАУ (11905 г.) обратили внимание на интересный факт, что сохраняемые в сперматеке матки спермин остаются активными и по прошествии нескольких лет. Они считали, что в сперматеке спермин находятся в состоянии постоянного движения. То же мнение было сформулировано и ДЭВИ (1965 г.), хотя еще ФЛАНДЕР (1939 г.) считал такое явление невозможным с биологической точки зрении и предполагал, что в сперматеке спермин неподвижны. Это последнее мнение было разделено и большим числом других авторов (БИШОП 1920 г., СМИРНОВ 1953 г., КУРЕННОЙ 1954 г., ДЕЙД 1960 г., РУТТНЕР и т. д.).

ЛЕНСКИЙ и ШИНДЛЕР (1967 г.) установили, что выделение сперм этической железы вызывает состояние (подвижности у спермиев, находящихся в сперматеке в состоянии анаболии.

В современной технике осеменения потребность в консервиравании сперматозоидов приобретает первостепенное значение, чтобы сделать возможным осеменение маток в конце сезона, в период когда число трутней начинает сокращаться, а также для того чтобы можно было отправлять сперму на большие расстояния, в области, куда зоосанитарные правила запрещают 1ввоз пчел. Необходимы вещества, которые смогли бы инактивировать спермин трутней, а также и другие вещества, способные активизировать их перед осеменением. Активность сперматозоидов оценивалась в зависимости от их подвижности.

Изучая подвижность спермиев, мы заметили их большую чувствительность к осмотическому давлению среды, степени ионной концентрации (рН), температуре, разбавлению и концентрации добавок. Однако, до сих пор не удалось опознать активное вещество, способное явно усиливать подвижность спермиев.

Проведенные опыты

В проведенных исследованиях и опытах выполненных нами в связи с подвижностью сперматозоидов трутня, среди других веществ мы использовали также прополис, в виде водной и соляной вытяжки. Вытяжки были изготовлены нижеследующим образом:

Вытяжка А: количество 20 г прополиса, собранного 14. VIII. 19712 г., непосредственно с верхней части рамки улья № 3 С (пасека Института по пчеловодным исследованиям, г. Дол), была элю кровава в 2 мл дистиллированной воды, в течение 5 недель, часто взбалтывая яробцрюу. Получили раствор бледно-желто-зеленоватого цвета.

Вытяжка Б: 20 г свежего прополиса было собрано в нескольких местах и из различных ульев 19.IX.1972 г. Прополис был экстрагирован в 1%-ном растворе хлористого натрия и затем через промежутки в 30 минут, 24 часа и 5 дней велись наблюдения над его действием на находящиеся в движении сперматозоиды.

Вытяжка С: 20 г прополиса, по меньшей мере трехлетней давности и неизвестного происхождения, экстрагировали в 2 мл 1%-ного раствора хлористого натрия. Эффект раствора был проверен по той же методике, как и в случае вытяжки Б.

Вытяжки из всех трех проб прополиса, полученные экстрагированием в течение не менее 48 часов, оказались высоко эффективными. Добавление ОД мл вытяжки при равном количестве 1%-ного раствора хлористого натрия, содержащего подвижные спермин вызывало немедленную реакцию, проявлявшуюся в прекращении движения спермибв. До полного высушивания кайли не было отмечено возобновления движения. После разбавления прополисной вытяжки (из расчета ОД мл вытяжки: 10 мл раствора хлористого натрия), наблюдалась в случае вытяжки А, отчетливо выраженная активизация неподвижных сперматозоидов, как полученных непосредственно от трутня, так и консервированных. Тот же эффект активизации был получен и при возобновлении опытов. Усиление подвижности сперматозоидов было очень явным; ни одно вещество из использованных нами прежде не оказывало такого стимулирующего влияния на подвижность трутневых сперматозоидов. Интенсивность движения сперматозоидов в два раза превышала (подвижность слермиав в соляных растворах.

Наибольшая подвижность слермиав была отмечена под влиянием разбавленного раствора прополиса - вытяжки А, сразу же после добавления его к среде со сперматозоидами. Движения сперматозоидов были оживленными, они перемещались по всему полю наблюдения. В соляных растворах, подвижность опермиав начинала проявляться постепенно, вначале по краям капли, через 21-3 минуты, а затем становилась общей на всем тюле, как правило, по истечении 4-б минут. Явными были также различия в подвижности в поле наблюдения.

Активная подвижность сперматозоидов, определенная разбавленной прополионой вытяжкой А, продержалась в течение 16 часов после активизации спермиев.

Прополисные вытяжки Б и С проявили в подобных условиях более сокращенный (практически до предела достоверности) активирующий эффект.

В заключение этого доклада о влиянии прополиса на подвижность трутневых спермиев нам хотелось бы подчеркнуть ориентировочный характер наших опытов и то, что выводы из них можно считать лишь предварительными. Нам удалось установить, что прополис содержит вещества, явно воздействующие на подвижность, трутневых спермиев, но настоящая природа этих веществ остается пока еще неизвестной. Мы не могли также уточнить является ли фактом или вещество, тормозящее в концентрированной вытяжке движение спермиев, тем же самым веществам, которое в растворе активизирует спермии. В дальнейшем необходимо установить, используя различные пробы прополиса, зависит ли различное воздействие от местности где был собран прополис или оно другой природы, например не зависит ли присутствие действующего вещества от определенного растения, с которого пчелы собирают прополис и т. д. Необходимо также изучить более подробно различные способы изготовления вытяжек и произвести детальные анализы химического состава последних.

Наш доклад обращает внимание на новое, до сих пор неизвестное свойство прополиса, нетрадиционного пчелиного продукта, содержащего многочисленные ценные вещества с до сих пор еще не полностью изученным действием, и вследствие этого мы считаем целесообразным отнестить внимательно к этому сырью, проведя как фармакологические, так и пчеловодные исследования.