КИВАЛКИНА В. П., БАЛАЛЫКИНА А. И., ПИОНТКОВСКИЙ В. И. (СССР) - ПЛАЗМОЦИТАРНАЯ РЕАКЦИЯ У БЕЛЫХ КРЫС, ИММУНИЗИРОВАННЫХ АНТИГЕНОМ С ПРОПОЛИСОМ

На предыдущем Международном конгрессе по пчеловодству сообщалось, что прополис при совместном введении его с антигеном повышает антителообразование, фагоцитоз, комплементарную активность сыворотки крови и содержание гамма-глобулинов (В. П. КИВАЛКИНА, 1969).

Цель настоящего исследования - изучить влияние прополиса, введенного совместно с антигеном, на плазмоцитарную реакцию. Плазмоклеточная реакции является одним из основных показателей иммунологической перестройки организма, проявляющейся в ранние сроки после иммунизации.

Материал и методика. Исследования проведены на 137 белых крысах. В качестве антигена использовали полный антиген (глюцидолипопротеиновый комплекс), извлеченный из S. enteritidis. Крыс первой группы иммунизировали антигеном, растворенным в физиологическом растворе. Крысам второй группы вводили тот же антиген, эмульгированный в ланолино-вазелиновой смеси, третьей - эмульгированный антиген с добавлением сапонина, четвертой - эмульгированный антиген с прополионым стимулятором. Антиген вводили однократно подкожно в область голени правой конечности. На 3, 6, 10, 15, 20, 27, 34, 44, 58, 75 и 90 день с момента иммунизации трех крыс из каждой группы подвергли эфирному наркозу, вскрыли, извлекли лимфатические узлы: правый подколенный (регионарный), мезенгериальные, парааортальные, левые подколенные и подлопаточные. В препаратах-оптечатках подсчитывали клетки плазмодитарного ряда по методу М. Л. ПОКРОВСКОЙ и Л. С. КОГАНОВОЙ (1947). Параллельно с изучением цитологических сдвигов определяли титры антител в гомогенатах из лимфоидных органов и в сыворотке крови. Из лимфоидных органов готовили гомогенаты, разводили физиологическим раствором 1:10, 1:20 и экстрагировали их сутки при 4°, затем центрифугировали и с надосадочной жидкостью и сывороткой крови ставили реакцию агглютинации по общепринятой методике.

Предварительными исследованиями было установлено, что у интактных животных в 50 полях зрения препаратов-отпечатков регионарных, лимфагйчеоких узлов обнаруживалось 6-9 клеток плазмоцитарного ряда.

Результаты исследования. Цитологический анализ но группам показал, что иммунологический ответ на введение антигена более интенсивно и в ранние сроки проявляется увеличением числа клеток плазмоцитарного ряда в регионарных лимфоузлах (рис. 1).

Рис. 1. Динамика клеток плазмоцитарного ряда в регионарных лимфоузлах белых крыс: _____ первая группа; ----- вторая группа; -.- третья группа; -..- четвертая группа

У белых крыс, иммунизированных полным антигеном, растворенным в физиологическом растворе (первая группа), на 3 день после иммунизации выявлен незначительный плазмобластоз в регионарных лимфатических узлах. Наибольшее количество клеток плазмоцитарного ряда (91) установлено на 6 день, в дальнейшем их уровень имел волнообразный характер. В отдаленных лимфатических узлах наблюдались аналогичные клеточные сдвиги, разница заключалась лишь в меньшей интенсивности плазмокдеточной реакции.

Антитела в гомогенатах из регионарных узлов выявлялись на 3 и б день после введения антигена. Максимальное количество их (1:1280) установлено на 15 день. В отдаленных лимфатических узлах антителогенез начал проявляться лишь на 15 день, наибольшие титры антител отмечены позднее, чем в регионарных (на 34 и 75 день). В сыворотке крови агглютинины обнаружены на 3 день опыта в титре 1:23. В дальнейшем титр их резко возрастал и достигал максимального значения (1:3460) на 44 день.

У животных, иммунизированных полным антигеном, эмульгированным в ланолино-вазелиновой смеси (вторая группа), увеличение количества плазматических клеток наблюдалось на 3 день опыта с преобладанием плазмо б ластов. Максимальное число (102) клеток плазмоцитарного ряда зафиксировано на 10 день после иммунизации. В последующие сроки число их достигало исходной величины с незначительным увеличением на 68 день.

Антитела в гомогенатах из регионарных лимфоузлов выявлялись на 3 и 6 день исследования, максимальное накопление их (1:5120) обнаружено на 34 и 58 день. В отдаленных лимфатических узлах антителообразование установлено на 10 день, с максимальным подъемом их титров на 58 день опыта. Нарастание титров агглютининов в гомогенатах из лимфоидных органов и сыворотке крови происходило параллельно, причем в первые сроки исследования титры антител в гомогенатах были выше, чем в сыворотке крови. Наибольшее количество агглютининов (1:3733) в сыворотке крови установлено на 44 день.

У белых крыс, иммунизированных полным антигеном, эмульгированным в ланолино-вазелиновой смеси, с добавлением сапонина (третья труппа) в регионарных узлах на 3 день обнаружено незначительное увеличение количества плазмобластов. Максимальное число клеток плазмоцитарнаго ряда (146) зафиксировано на б день исследования. В дальнейшем наблюдалось снижение их уровня до исходных величин с незначительным увеличением на 44 и 90 день. Отдаленные лимфоузлы имели клеточные сдвиги такого же характера, что и регионарные, но менее интенсивные.

Антитела в гомогенатах из регионарных лимфоузлов выявлялись на 3 день иммунизации. Наивысшее количество их отмечено на 15 день в титре 1:2560. Отдаленные лимфоидные органы в процессе антителогенез а включались постепенно, полное вовлечение наблюдалось на 16 день, а наибольшее количество антител в них установлено на 44 день опыта. Титры агглютининов в сыворотке крови и гомогенатах увеличивались одновременно с количественным преобладанием их в ранние сроки после иммунизации в гомогенатах. Максимальное количество агглютининов в титре 1:3733 обнаружено в сыворотке крови на 34 день, когда в гомогенатах из регионарных лимфоузлов титры антител снижались.

У животных, иммунизированных антигеном, эмульгированным в ланолино-вазелиновой смеси с добавлением прополиса (четвертая группа), на 3 день после введения антигена в регионарных лимфатических узлах наблюдалось нарастание количества плазмобластов. Максимальное накопление клеток плазмоцитарного ряда (544) отмечалось на 6 день опыта. Плазматические клетки лежали группами по 5-00 клеток в минотных шнурах модулярной области и редко в коре лимфатического узла, среди них преобладали незрелые плазматические клетки. В следующие сроки исследования - количество клеток плазмоцитарного ряда уменьшалось, не достигая нормы. На 20 и 27 день число их было незначительным с преобладанием зрелых плазматических клеток. Второй подъем увеличения числа (клеток плазмоцитарного ряда (117) наблюдался на 34 день эксперимента а к концу опыта оно приблизилось к норме. Отдаленные узлы дали аналогичную по характеру, но менее интенсивную клеточную реакцию. Максимальное число клеток плазмоцитарного ряда в них установлено также на 6 день иммунизации и в дальнейшем на протяжении всего эксперимента оно было больше нормы.

Антитела в гомогенатах из регионарных узлов обнаруживались на 3 день после иммунизации. Уровень их достигал максимального значения на 27 день в титре 1:10240, затем наблюдалось снижение титров с последующим повторным увеличением на 68 день до титра 1:51120. Отдаленные лимфоузлы вовлекались в антителогенез уже на 6 день, наибольшее накопление антител отмечено на 27 день. Уровень антител в сыворотке крови имел волнообразный характер с максимальным увеличением на 27 денц при этом разведение сыворотки равнялось титру 1:13866. У животных данной группы титры антител в гомогенатах из регионарных узлов и в сыворотке крови увеличивались параллельно с наивысшими показателями в одни и те же сроки.

Следовательно, подкожное введение полного антигена сопровождается иммуно-морфолопической перестройкой в лимфатических узлах, в которых накапливаются клетки плазмоцитарного ряда и специфические антитела. При этом у белых крыс, иммунизированных полным антигенам с прополионым адъюваятом, пролиферация клеток плазмоцитарного ряда в регионарных лимфоузлах была в 3,7-6 раз интенсивнее, чем у животных других групп.

Сопоставление данных морфологического и серологического исследования позволило установить, что увеличение числа плазматических клеток в регионарных узлах предшествовало накоплению специфических (антител. Антитела в гомогенатах из регионарных лимфоузлов выявлялись раньше, чем в сыворотке крови и содержались в более высоких титрах. Однако у белых крыс, привитых эмульгированным антигеном с прополисом, в сыворотке крови почти ва всем протяжении опыта антитела содержались в более высоких титрах, чем в гомогенатах за счет активного вовлечения в антителогенез не только регионарных, но и отдаленных лимфоузлов. Титры агглютининов в сыворотке крови белых крыс, иммунизировэнных антигеном с прополисом, были в 3,7-4 раз выше, чем у животных, привитых полным антигеном в сочетании с другими адъювантами. Такая же закономерность выявлена при межгрупповом сравнении максимальных титров антител в гомогенатах из регионарных узлов.

Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что прополис, введенный в организм животных в сочетании с антигеном, обусловливает более интенсивную плаэмоклеточную реакцию и стимулирует аетителоабразование в регионарных и отдаленных лимфоидных органах лабораторных животных.

ЛИТЕРАТУРА

КИВАЛКИНА В. П., 1969 - XXII Международный конгресс по пчеловодству. Доклады советских ученых и специалистов, с. 255.

ПОКРОВСКАЯ М. П.. КАГАНОВА Л. С, 1947 - Свердловак.